كلية التقنيات الإحيائية جامعة النهرين تناقش اطروحة دكتوراة عن "
Anticancer and immunological evaluation of purified cystosine deaminase produce from locally isolates Peseudmonas aeruginosa
اجريت المناقشه العلنيه لطالبةالدكتوراة (نور عبد اللطيف عبد الله)عن اطروحتها الموسومة
Anticancer and immunological evaluation of purified cystosine deaminase produce from locally isolates Peseudmonas aeruginosa
وترأست الاستاذ الدكتورة "شهلاء مهدي صالح " رئيسة قسم التقنيات الحيوية الجزيئية والطبية في كلية التقنيات الإحيائية جامعة النهرين ، فيما ضمت اللجنة عضوية كلا من:
- ا.د فراس عبدالله حسن - جامعة النهرين كلية العلوم عضواً
- ا.د محمد محمود فرحان/جامعة النهرين- مركز بحوث التقنيات الاحيائية- عضوا
- ا.م.د علياء رزوقي حسين/ جامعة بغداد-كلية العلوم - عضوا
- ا.م. د ميادة صلال مهدي / جامعة النهرين- كلية التقنيات الاحيائية -عضوا
- ا.م.د. رقية محمد ابراهيم/جامعة النهرين- كلية التقنيات الاحيائية- عضوا ومشرفا
- ا.د نضال سهيل زبار /جامعة النهرين- كلية التقنيات الاحيائية
واستهدفت الاطروحة جمع 120 عينة مرضية من مصابين بالحروق والجروج والتهابات المسالك البولية من مستشفى اليرموك التعليمي في بغداد .
و اظهرت نتائج التشخيص الأولية والثانوية التي اعتمدت على الصفات المظهرية والزرعية والفحوصات الكيموحيوية ان 50 عزلة عزلة تنتمي الى الزائفة الزنجارية Pseudomonas aeruginosa ، وقد تم تاكيد هذه النتيجة باستخدام نظام VITEK
وتم اختبار قابلية العزلات السبع في إنتاج انزيم " ارجنينيز " واظهرت النتائج ان جميع هذه العزلات كانت منتجة الارجينيز وبدرجات متفاوتة .
وتوصلت الدراسة الى تحديد تأثير مكونات الوسط الزرعي على إنتاج انزيم الارجينيز وجاءت أعلى إنتاجية للانزيم بعد دعم الوسط الانتاج 1% مالتوز و 1 % تريبتون و 1.5% ارجنين وعند 7.5 الرقم الهيدرجيني وحضن بدرجه حراره 37 درجة مئوية لمدة 36 ساعه تحت هذه الظروف بعد تنقية انزيم الرجنينيز ، ووصلت الفعالية النوعية لانزيم المنقى 76.9 الى وحدة / ملغم بروتين بعدد مرات تنقية 11.5 وحصيله انزيمية %50.
و اعطى الانزيم اعلى فعالية عند الاس الهيدروجيني )6,7,8) وكان ثابتا ضمن الرقم الهيدروجيني 8. كما لوحظ ان اقصى فعالية للانزيم عند درجة حرارة 40 مئويه وكان أكثر ثباتية عند درجات الحرارة تراوحت بين 40-30 درجة مئوية .
و ثبطت الفعالية الانزيمية بوجود كل من ثنائي امين االيثيلين رباعي حمض السيتيك بينما ازدادت الفعالية الانزيميه المتبقية بوجود كل من كلوريد المنغنيز والمغنيسيوم والزنك والنحاس و ادى الى زيادة الفعالية المتبقية للانزيم (80% and ،%107، %123، 140%) على التوالي.
اما بشأن دراسة التاثير السمي والتثبيط الخلوي لخلايا سرطان الثدي MCF7، الكبد HepG2, و البروستات PC3 السرطانية، قد بلغ اعلى تثبيط انزيمي على خلايا سرطان الثدي وبتركيز مثبط وسطي بلغ 116.0 ميكروغرام/ مل بالمقارنة مع الخلايا الطبيعيه. ولم يظهر اي تاثير سمي على الخلايا الطبيعية. بعد ان تم اخذ خمس تراكيز من الانزيم المنقى (200، 100، 50، 25، and 12.5 μg/ml) على الخلايا الثدي السرطانيه لتحديد التغييرات الخلويه الست
viable cell count VCC, nuclear intensity NI, cell membrane permeability ( CMP, mitochondrial membrane potential MMP and cytochrome C)
واظهرت الدراسه ان تركيز (200 μg/ml) أعلى فعالية من بين العوامل الخلويه مقارنة بالنماذج الطبيعيه. وبينت نتائج تاثير الانزيم على الطور الخلوي لانقسام وانتشار خلايا الثدي السرطانية الى تجمع الخلايا عند الطور G1 لهذا السبب منع الانتقال من بين الاطوار عند تركيز 400 μg/ml.الجزء الاخر من دراسه الانزيم على انتاج cytokines المناعيه (IL-12 and TNF-α) من خلايا سرطان الدم مقارنة مع خلايا لاشخاص سليمين ،تبين التاثير غير معنوي.
واختتمت النتائج بالتوصل الى ان للانزيم تأثير على زياده إنتاج السايتوكانيات المناعيه 9 Caspase (3/7 and لخلايا سرطان الثدي )2236±60435 and 53099±3133(على التوالي عند تركيز الأنزيم (200 μg/mL) خلال 24 ساعة